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细胞核蓝色荧光染料DAPI图片
产品货号:
KM0159
中文名称:
细胞核蓝色荧光染料DAPI
英文名称:
4',6-Diamidino-2'-phenylindole
产品规格:
10mg
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本品为DAPI的二盐酸盐,粉末形式,易溶于水。用于细胞核染色时,推荐工作浓度为0.5-10μg/ml。

DAPI是一种蓝色荧光染料,选择性结合双链DNA的小沟区(优先结合AT富集的DNA)形成稳定的复合物,产生比DAPI约强20倍的荧光。DAPI的最大激发/发射波长为340/488nm,DAPI-DNA复合物的最大激发/发射波长为364/454nm,通常用作荧光显微术、流式细胞术和染色体染色的细胞核复染剂。由于对DNA的高亲和性,DAPI还常常被用在细胞计数、凋亡检测、支原体污染检测、基于DNA内含物的细胞分选,以及高内涵成像分析中的核分割工具。虽然高浓度情况下DAPI能够进入活细胞,但DAPI不具细胞膜渗透性,通常情况用来染固定细胞。对于活细胞染色,Hoechst 33342(货号:KM0013)是一种受欢迎的具细胞膜渗透性的核复染剂。

主要参数:
CAS NO:28718-90-3
分子式:C16H15N5·2HCl
分子量:350.25
纯度:>90%(from N)
溶解性:溶于水(1-5mg/ml)
Ex/Em:340/488nm(DAPI);364/454nm(DAPI-DNA);
结构式:
DAPI二盐酸盐结构式
保存:室温干燥避光保存,2年有效。

使用方法:

一、储存液配制
用双蒸水溶解,配制1-5mg/ml的储存液。-20℃避光保存1年,建议分装保存,避免反复冻融。
注意:本品不可以用缓冲液直接溶解。

二、工作液配制
用双蒸水或PBS稀释母液,配制成所需要的工作浓度(0.5-10μg/ml)。

三、固定的细胞或组织染色
对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。DAPI染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色,则直接进行DAPI染色。
1.对于贴壁细胞或组织切片:加入适量DAPI染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5min。
2.吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5min。
3.直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。Ex/Em=364/454nm。

四、活的细胞或组织染色
1.细胞培养物中加入适量DAPI染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。对于六孔板,一个孔通常需加入1ml染色液;对于96孔板,一个孔通常需加入100μl染色液。
2.在37℃培养细胞10~20min。
3.用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
4.直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。Ex/Em=364/454nm。

注意事项:
1.DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2.荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3.为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
相关搜索:细胞核蓝色荧光染料DAPIDAPI二盐酸盐DAPI4',6-Diamidino-2'-phenylindole28718-90-3
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